生物类黄酮的提取方法分析

【生物类黄酮概述】

生物类黄酮就是指维生素P，是一种植物的次级代谢产物，不是某一种单一的化合物，而是某一类具有相同或相似结构及活性的物质总称。生物类黄酮在抗氧化、抗血栓、保护心脑血管等方面有着良好的表现，故一直深受人们重视，对其研究工作也一直在进行。

【生物类黄酮摄取方法】

目前，生物类黄酮的提取主要有：有机溶剂萃取法、醇提取、酶法、碱性水或碱性稀醇提取法及临界革取法等方法。使用的设备通常叫提取罐。

【有机溶剂萃取法】

有机溶剂萃取法是目前世界上采用比较广泛的 一种提取生物类黄酮的方法，也比较容易在工业化生产中得到运用。

有机溶剂萃取法原理：就是将干燥的原料弄湿再用胶体磨粉碎之后，利用合适的有机溶剂进行萃取、过滤。

有机溶剂萃取法特点：这种方法的优点是设备比较简单、操作较为方便，且得到的产品比较多；缺点是产品中含的杂质较多。

有机溶剂萃取法中溶剂的选择尤为重要，必须要根据生物类黄酮化合物预期所混杂的杂质之间性的不同进行选择，才能生产出纯度更高的产品。 就目前而言，比较适合于提取生物类黄酮的有机溶剂有石油醋、正丁醇、乙酸乙酮等。

【醇提法】

甲醇和乙醇都是比较适合于提取生物类黄酣的提取剂，但由于甲醇具有较强的毒性，一般只会在的情况下使用。因此，一般都采用乙醇来作为有机溶剂。通常采用冷浸以及热抽的提法来提取，乙醇的体积浓度范围为60%-95%，进行提取的次数以2-4次为宜。

例如，以西芹为提取生物类黄酮的测试样品时的醇提取法：

可以使用乙醇作为提取剂。西芹与乙醇之间的质量比大致为1:2，在80′c的恒温下进行回流提取2h-4h。

由于西芹之中所蕴含的生物类黄酣物质量较多，其提取的效果也比较好。其中叶绿素虽然不会对类黄酮物质的检测产生干扰，如先使用乙醇去除叶绿素后，对于生物类黄酮的提取率有一定的帮助。以体积浓度为80%的乙醇作为提取剂，在70°c的恒温下，对银杏叶进行回流提取约1h，并将之与水提法的结果进行比较，其效果和效率都明显过水提法。
但并不是任何时候使用乙醇作为提取生物类黄酮的提取剂都能够取得较好的效果。根据相关的研究表明，如果分别使用甲醇和乙醇来对竹叶中的生物类黄酮进行回流提取，以甲醇作为提取剂，在ω℃的恒温之下进行40nún的回流提取，比用体积浓度为70%的乙醇置于沸水洛中进行40min的回流提取效果要好的多。因此，具体要使用哪一种提取剂，必须要进行综合考虑。

醇提法分类：醇提法主要有冷浸法和回流法，两种方法各有优劣。

冷浸法特点：优于不需要加热，因此更有利于保持提取物质的相关成分，但是缺点也比较明显，就是耗时长，效率低下。

回流法特点：则因为必须要加热，虽然其效率比较高，但也容易导致一部分对温度比较敏感的成分损失，故而必须谨慎使用。

【酶法】

酶法原理：酶法主要是利用酶将原材料中的一些大分子物质进行水解，从而使其中的生物类黄酮物质能够被充分的释放出来，进而有效提高生物类黄酮的提取率。

酶法特点：酶法提取一般都要与其他的一些提取方法结合使用，才能发挥各自较大的效用，提高提取效率。

酶法提取案例：

例如，山植中生物类黄酮的提取，可先用果酶将果胶分解掉，再来对生物类黄酮进行提取和分离纯化。

最后根据试验结果可以知道，果胶在被果胶酶充分分解之后，会变成一些小分子物质，从而使山植果肉中所含的黄酮类物质能够被充分释放出来。

试验结果表明，使用酶法结合其他一些目前比较常用的提取法，能够有效提高山植生物类黄酮的提取 率约 2%-3%。而如果是使用纤维素酶先对一些像葛根类的植物进行水解，比不结合酶法进行提取， 其提取率可提高13%以上。
因此，充分利用酶法结合其他一些常用的提取方法，是提高生物类黄酮提取率十分有效的方法。

【碱性水或碱性稀醇提取法】

碱性水或碱性稀醇提取法原理：由于黄酮类物质其成分结构大多是酷程基，因此，使用碳酸钙、氢氧化铀、氢氧化钙等一些碱性水，或者是一些碱性的稀醇来浸泡，浸泡液在酸化之后，就能够分离出类黄困化合物，这也是提取生物类黄酮的一种有效的方法。

使用碱性水或碱性稀醇提取法事项：需要重点注意的是， 进行碱性水或碱性稀醇提取法时，其碱液的浓度不能太高。因为生物类黄酮化合物的母核在强碱的环境下会受热而遭到破坏，从而使得其中的有效成分变质。所以一般情况下，要先使用戴维斯法对样品进行相关的测试工作。

碱性水或碱性稀醇提取方法案例

具体的做法以葛报提取为例，葛根黄酮的结构中，酷程基易溶于碱水，所以能以饱和 Ca(OH)2 当做水溶液，以 6 倍质量提取 2 次，再以 8 倍质量提 取 1 次。取 5 g 的葛根粗阳，加入到准备好的的 Ca (OH)2 水溶液中，6 倍质量的提取时间分别为10min 和 30 min ，8 倍质量提取时间为 120 min ，最后再合并提取液，并将其 pH 值调至 5，减压浓将体积浓度为 95%的乙醇与浓缩液混合直到乙醇体积浓度达到 65%，静置 30 min ，回收乙醇，就得到生物类黄酮了。

【临界流体萃取法】

临界流体萃取法原理：是利用某些溶剂在临界点附近具有的不同特性，对混合物中一些可溶性组分进行提取的一种的分离技术。

临界流体萃取法特点：与传统的提取方法主要的特点是产品的回收率以及纯度都比其提取方法高，从而有效提高产品的质量，也在某种程度上降低了生物类黄酣提取的能耗。

临界流体萃取法案例

以临界CO2萃取方法为例，其主要的原理就是在高压的临界状态之下，将液体CO2当做提取可进行抽提，之后再进行减压分离，当外界环境的压力下降之后，液体CO2就会汽化，从而使得所要提取的有效成分被分离出来。

目前，临界流体萃取法是较的提取方不仅没有有机溶剂残留问题，而且植物中的天然活性成分以及对温度比较敏感的成分都不会坏。因此，对于像银杏叶之类的植物要提取其活性成分时，临界流体萃取法无疑是选择。

来源：惠合浓缩器